方法名称： |
双黄连口服液-绿原酸的含量-高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定双黄连口服中绿原酸的含量。 |
方法原理： |
采用高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸含量。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇 水 冰醋酸=22 78 1为流动相,流速1.0ｍｌ/ｍｉｎ,检测波长327ｎｍ,柱温为室温。以外标法按峰面积计算含量。 |
试剂： |
1. 甲醇(色谱纯) 2. 冰醋酸(分析纯) 3. 三乙胺（分析纯) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Ｃ18色谱柱(4ｍｍ×25ｃｍ,5μｍ) 2 色谱条件 2.1流动相：甲醇 水 冰醋酸=22 78 1 2.3柱温：室温 2.4流速：1.0mL/min 2.5检测波长：327nm |
试样制备： |
1.标准溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1ｍL含40.02μｇ的溶2. 供试品溶液的制备 精密量取本品10ｍL置蒸发皿中水浴蒸干,加50%甲醇适量,超声处理30分钟,置于25ｍL容量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,取续滤液再经0 45μｍ的微孔滤膜滤过,即得。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1ｍL含40.02μｇ的溶液作为对照品溶液(10℃以下保存)。精密吸取对照品溶液1.0,2.0,4.0,6.0,8. 0,10.0ｍL于10ｍL量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀。取上述对照品稀释液各10μL,按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积为纵坐标,以绿原酸对照品进样量为横坐标作图,通过原点的直线,得回归方程。 2. 供试品的测定 分别取5个批号同上法操作的供试品溶液各10μL进样,记录峰面积积分值,以外标法计算样品中绿原酸含量。 |
参考文献： |
张丽萍，刘 钰，张雪光.高效液相色谱法测定双黄连口服液中绿原酸的含量. 湖北中医杂志，2003，25（9)：46-47 |
