方法名称： |
葛根芩连微丸—盐酸小檗碱的测定—分光光度法 |
应用范围： |
本方法采用二阶导数分光光度法测定葛根芩连微丸中盐酸小檗碱的含量。 本方法适用于中成药葛根芩连微丸。 |
方法原理： |
供试品加乙醇加热回流提取，过滤，滤液用乙醇稀释制成供试液，置紫外可见分光光度计，绘制二阶导数光谱，计算盐酸小檗碱的含量。 |
试剂： |
无水乙醇 |
仪器设备： |
1.紫外可见分光光度计 2. 电光分析天平 |
试样制备： |
1. 称取供试品 精密称取在60℃干燥1h的本品粉末(过四号筛-65目)约 0.2g 2. 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重盐酸小檗碱对照品4mg，置100mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，作为对照品溶液。 3. 标准品溶液的制备 精密量取上述对照品溶液适量，以无水乙醇分别稀释成2、4、6、8、10 μg/mL的溶液，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。 4. 供试品溶液的制备 将供试品置于锥形瓶中，加无水乙醇30mL，水浴加热2h，趁热滤过，无水乙醇洗涤滤渣和容器2次。合并滤液于50mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。精密量取此溶液1.0mL置10mL量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一，“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 分别精密吸取上述对照品溶液进入紫外可见分光光度计，绘制二阶导数光谱图，读取在365nm处的峰零间振幅L值，与浓度C进行线性回归，得到回归方程。 2.供试品的测定 供试品绘制二阶导数光谱，按标准曲线下操作，计算盐酸小檗碱含量 注：分光光度法应以配制供试品的同批溶剂为对照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波长作为测定波长，一般供试品的吸收度读数，以在0.3－0.7之间的误差较小。仪器的狭缝波带宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度偏低。狭缝宽度的选择，应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准。由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。 |
参考文献： |
徐英瑜、张家康. 二阶导数光谱法测定葛根芩连微丸的含量. 中国医院药学杂志，1999，19（1)：31-32. |
