黄连上清丸—大黄素的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定黄连上清丸中大黄素的含量。

本方法适用于中成药黄连上清丸。

将供试品置索氏提取器内，加乙醚回流提取，将提取液挥干，加甲醇定容作为供试品液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液，分别注入液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测大黄素吸收值，以外标法计算含量。

1, 甲醇（色谱纯)

2, 磷酸水溶液 2%(mL/mL)

3. 乙醚

1 仪器

1.1 索式提取器

1.2 高效液相色谱仪

1.3 色谱柱

Kromasil C₁₈ 柱 (150 × 4.6mm，5µm)。

1.4 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 2%磷酸水溶液 = 5 95

2.2 流速：1.0mL/min

2.3 检测波长：254nm

2.4 柱温：45℃

1. 称取供试品

精密称取本品粉末试样1g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品10.30mg，加甲醇溶解并稀释至100mL，摇匀，精密吸取上述溶液1mL，置10mL容量瓶中，加甲醇稀释至10mL，摇匀，作为对照品溶液。

3. 供试品溶液的制备

将供试品置索氏提取器内，用乙醚回流提取5小时至提取液无色，挥去乙醚，用甲醇定容于50mL容量瓶中，用0.45µm滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 标准曲线的绘制

精密吸取上述对照品溶液4、8、12、16、20µL分别注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定大黄素的吸收值，以对照品溶液进样量对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10µL，分别注入液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长254nm处测定大黄素的吸收值，以外标法计算出其含量。

庄惠清，陈敏. 高效液相色谱法测定黄连上清丸中大黄素的含量. 海峡药学，2003，15(2)：33-34.