黄连上清丸—盐酸小檗碱的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定黄连上清丸中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中成药黄连上清丸。

将供试品加甲醇盐酸加热，超声提取，提取液加甲醇过滤，滤液作为供试品液。精密吸取对照品溶液和供试品液，分别注入液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长265nm处检测大黄酸吸收值，以外标法计算含量。

1. 乙腈（色谱纯)

2. 0.1mol/L磷酸二氢钠溶液

3. 0.025mol/L十二烷基硫酸钠溶液

4. 盐酸

5. 甲醇

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

YWG - C₁₈ 柱 (250 × 4.6mm，5µm)

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：

乙腈 0.1mol/L磷酸二氢钾溶液 0.025mol/L十二烷基硫酸钠溶液 = 50 25 25

2.2 流速：1.3mL/min

2.3 检测波长：265nm

2.4 柱温：室温

1. 称取供试品

精密称取本品粉末0.5g。

2. 对照品溶液的制备

精密称定盐酸小檗碱对照品适量，加盐酸-甲醇(1:100)溶液溶解并制成每1mL含盐酸小檗碱0.04mg的对照品溶液。

3. 标准溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品0.0109g，置100mL量瓶中，加盐酸-甲醇(1:100)混合溶液溶解并定容，摇匀。精密量取此溶液2mL置5mL量瓶中，加盐酸-甲醇(1:100)混合溶液稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置具塞锥形瓶中，精密加人盐酸-甲醇(1:100)混合溶液25mL，称定重量，置50°C水浴中加热15min，放冷，超声处理30min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.标准曲线的绘制

精密吸取上述标准溶液1、5、10、15、20、25µL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长265nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，以标准溶液进样量对峰面积绘制标准曲线方程，进行线性回归，得到回归方程。

2.供试品的测定

精密吸取对照品溶液和供试品液各10µL，分别注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长265nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，以外标法计算出其含量。

黄萍，罗凤琴. HPLC测定黄连上清丸中盐酸小檗碱的含量. 华西药学杂志，2003，18(2)：139-140.