方法名称: |
霍香正气水—欧前胡素、异欧前胡素的测定—高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定霍香正气水中欧前胡素、异欧前胡素的含量。 本方法适用于中成药藿香正气水。 |
方法原理: |
供试品加甲醇适量超声提取,滤过,滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长254nm处检测欧前胡素、异欧前胡素的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇(色谱纯) 2. 乙醚 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Hyper ODS 2 C18(200 × 4.6mm) 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相:甲醇 水 = 70 30 2.2 检测波长:254nm 2.3 柱温:室温 |
试样制备: |
1. 量取供试品 精密量取供试品2.5mL。 2.对照品溶液的制备 精密称取标准品欧前胡素、异欧前胡素适量,分别加甲醇溶解并稀释成每ml中含 0.1mg的溶液,作为对照品溶液。 3.标准溶液的制备 将上述两种对照品溶液分别用甲醇稀释成梯度浓度的溶液,摇匀,作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。 4. 供试品溶液的制备 将供试品置25mL量瓶中,加入甲醇适量,超声提取20min,加甲醇定容。用0 .45μm滤膜过滤,作为供试品溶液。 注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤: |
1.标准曲线绘制 分别精密量取上述标准溶液10µL进入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定欧前胡素、异欧前胡素的吸收值,以峰面积积分值对标准溶液浓度绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。 2.供试品的测定 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长254nm处测定欧前胡素、异欧前胡素的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
王虹、刘雅琴. 高效液相色谱法测定藿香正气水中欧前胡素、异欧前胡素的含量. 中医药信息,1999,第2期:61-62. |