黄杨宁片－环常绿黄杨碱D的测定－薄层色谱法

本方法采用薄层扫描法测定黄杨宁片中环常绿黄杨碱D的含量。

本方法适用于中成药黄杨宁片。

供试品研成粉末，用氯仿水浴回流，过滤，滤液定容，制成供试液，点样、展开，以改良碘化铋钾显色，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λ_S=500nm，λ_R=700nm测量环常绿黄杨碱D吸收度积分值，计算其含量。

1. 氯仿

2.改良碘化铋钾

3. 浓氨试液

4. 苯

5. 丙酮

1 仪器

1.1 薄层扫描仪

1.2 涂布器

应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

1.3点样器

一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

1.4展开室

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2材料

2.1玻板

用10cm × 10cm、10cm × 15cm、20cm × 10cm或20cm × 20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

2.2吸附剂

硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10－40µm。

1. 对照品溶液的制备

精密称取环常绿黄杨碱对照品适量，加氯仿制成每1mL各含1mg的溶液，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密称取供试品粉末约1.5g，置氯仿20mL中水浴回流1小时，过滤，滤液稍加挥干，以氯仿定容至10mL，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.薄层板制备

将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25－0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。

2.点样

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各2µL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.展开

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以苯－丙酮（3：1)为展开剂，展开至8－15cm时，取出薄层板，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液显色，取出，晾干。

4.含量测定

在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用双波长进行扫描，波长：λ_S =500nm，λ_R=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。