黄氏响声丸—贝母素乙的测定—薄层扫描法

本方法采用双波长薄层扫描法测定黄氏响声丸中贝母素乙(C₂₇H₄₃NO₃)的含量。

本方法适用于中成药黄氏响声丸。

供试品加乙醚-氯仿-乙醇，过滤，滤渣用同样的混合溶液冲洗，合并滤液和洗液，蒸干残渣用氯仿溶解，制成供试液，点样、展开，以碘化铋钾溶液显色，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λ_S=516nm，λ_R=650nm测量贝母素乙(C₂₇H₄₃NO₃)吸收度积分值，计算其含量。

1. 乙醚

2乙醇

3. 氯仿

4. 碘化铋钾溶液

5. 乙醇

6. 浓氨水

7. 醋酸乙酯

8. 石油醚

9. 甲醇

1. 仪器

1.1 双波长薄层扫描仪

1.2涂布器

应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

1.3点样器

一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

1.4展开室

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

2.2吸附剂

硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。

1. 对照品溶液的制备

取贝母素乙对照品，加氯仿制成每lmL中含0.5μg的溶液，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品适量，去糖衣，研细，过筛，取l0g，精密称定，加适量硅藻土混合，加7-l0μL浓氨水湿润，置于100mL量瓶中，加混合溶液乙醚-氯仿-乙醇(25:8:2.5)50mL，混匀，超声处理30min，冷浸过夜，过滤，滤渣用混合溶液(同上)10mL冲洗三次，合并滤液和洗液，自然挥干，加氯仿少许使残渣溶解并定容至2mL，摇匀，作为供试品溶液，同法制备不含贝母的阴性对照液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.薄层板制备

将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。

2.点样

吸取上述三种溶液(对照品、供试品、阴性对照品)各4μL、10μL、10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.展开

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以石油醚－醋酸乙酯－甲醇－浓氨水(10:10:2:1)为展开剂，饱和30min，上行展开l0cm，取出，晾干，完全挥去溶媒后，喷以碘化铋钾试液显色，晾干。供试品与对照品在薄层色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点；阴性对照品与对照品在薄层色谱相应的位置上不出现斑点。

4. 标准曲线的制备

分别吸取对照品溶液2，4，5，6，8μL分别点于同一薄层板上，按上述薄层层析条件，展开、显色、扫描，以贝母素乙点样量对斑点面积积分值绘制标准曲线,进行直线回归，得到回归方程。

5.含量测定

在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，用双波长进行扫描，波长：λ_S =516nm，λ_R=650nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。

用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。

徐玮一,杨勤,王洪等.黄氏响声丸的定量分析.江苏药学与临床研究,2001,9(2):21-22.