清胃黄连丸－盐酸小檗碱的测定－薄层扫描法

本方法采用薄层扫描法测定清胃黄连丸中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中成药清胃黄连丸。

供试品于索氏提取器中加热回流，过滤，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解，制成供试液，点样、展开，UV－365灯下显色，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λ＝343nm测量盐酸小檗碱吸收度积分值，计算其含量。

1.正丁醇

2.冰醋酸

3.甲醇

1 仪器

1.1 索氏提取器

1.2 薄层扫描仪

1.3涂布器

应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。

1.4点样器

一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

1.5展开室

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2材料

2.1玻板

用20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。

2.2吸附剂

硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。

1. 称取供试品

精密称取供试品样品1.2g。

2, 标准溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱适量，加盐酸－甲醇(1:100)制成每1mL含0.2mg的溶液，作为标准品溶液。

3. 供试品溶液的制备

将供试品置索氏提取器中，加盐酸－甲醇(1:100)提取至溶剂无色。将提取液浓缩，转移至50mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀，过滤，弃去初滤液，取续滤液，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1.薄层板制备

将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。

2.点样

精密吸取供试品溶液、对照品溶液1～4μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3.展开

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以正丁醇-冰醋酸-水（7:1:2)10℃以下放置12小时的下层溶液为展开剂，展开至8～15cm时，取出薄层板，晾干。

4.标准曲线的绘制

精密吸取l，2，3，4μL，点样于同—硅胶G薄层板上，放入以正丁醇－冰醋酸－水(7:1:2)饱和的层析缸中，展开，取出，热风吹至无正丁醇味，置UV365灯下确定斑点位置，以单波长反射法锯齿扫描：λ＝343nm。Sx＝3，狭缝2mm×2mm，以吸收峰面积积分值对对照品点样量绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

5.含量测定

取出薄层板，热风吹至无正丁醇味，置UV365灯下确定斑点位置，以单波长反射法锯齿扫描：λ＝343nm测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。

韩桂茹，王元度，冯丽. 清胃黄连丸质量标准的研究. 中国中药杂志，1993，18（2)：93-95.