方法名称： |
消咳喘糖浆－杜鹃素的测定－薄层扫描法 |
应用范围： |
本方法采用薄层扫描法测定消咳喘糖浆中杜鹃素的含量。 本方法适用于中成药消咳喘糖浆。 |
方法原理： |
供试品用乙醚提取后用乙醇除去水溶性杂质，用乙醚提取，于硅胶G板展开后，在薄层扫描仪上进行扫描，波长400nm，线性扫描，测供试品和对照品峰面积的积分值，照外标两点法计算出其含量。 |
试剂： |
1. 乙醚 2. 乙醇 3. 正己烷 4. 醋酸乙酯 5. 甲醇 6. 三氯化铝 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 薄层扫描仪 1.2点样器 一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.3展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。 2材料 2.1玻板 用10cm × 10cm、10cm × 15cm、20cm × 10cm或20cm × 20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。 2.2吸附剂 硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10－40µm。 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 精密称取杜鹃素，加氯仿制成约每1mL含2mg的对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 精密称取样品50mL，加乙醚振摇提取3次，每次30mL，合并乙醚液，蒸干，残渣分3次加40％乙醇各20mL，置水浴上溶解，趁热滤过，用40％乙醇洗涤3次，每次5mL，置水浴上蒸去乙醇，水浴液加乙醚振摇3次，每次30mL，合并乙醚液，蒸干，残渣加氯仿定容于2mL容量瓶中,作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.薄层板制备 将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25－0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。 2.点样 精密吸取样品溶液5µL与10µL对照品溶液5µL与10µL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0－1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况，以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 3.展开 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以正己烷-醋酸乙酯-甲醇（5:5:0.2)为展开剂，展开，取出薄层板，晾干，喷以三氯化铝试液，在105℃烘5—7min，取出，晾干。 4.含量测定 在薄层扫描仪上，照色谱法进行扫描，波长400nm，线性扫描，测定供试品和对照品峰面积积分值，计算。 用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。 |
参考文献： |
方红玲，张锂. 薄层扫描法测定消咳喘糖浆中杜鹃素的含量. 中国药业， 1999，8（4)：26． |
