方法名称： |
乐脉颗粒－丹参素－高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定乐脉颗粒中丹参素的含量。 本方法适用于中成药乐脉颗粒。 |
方法原理： |
供试品水超声定容滤过，用高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长280nm处检测丹参素的吸收值，计算其含量。 |
试剂： |
1.甲醇 2.醋酸铵 3.硫酸 4.丹参素对照品(上海医科大学) |
仪器设备： |
1. 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Shimpack CLC-ODS(150×6mm,5μm) 为分析柱，自填 YWGC18 (10×46mm,10μm)为保护柱。 1.3 紫外吸收检测器 1.4 数据处理机 1.5 超声发生器 2 色谱条件 2.1流动相：甲醇＋0.2mol/L醋酸铵(硫酸调节pH2.2)＝12＋88。 2.2检测波长：280nm 2.3柱温：室温 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 取丹参素钠对照品适量，精密称定，用50%甲醇溶解，并稀释定容，制成每1mL含丹参素钠0.1mg的溶液作对照品溶液。配制对照品溶液,并稀释成系列溶液。 2. 供试品溶液的制备 取本品约2g，精密称定，置锥形瓶中，加水30mL，置超声振荡器中振荡约10min使溶解，全部转移至50mL量瓶中，并用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作本品供试品溶液。 |
操作步骤： |
1.标准曲线与线性范围 分别精密吸取系列溶液10μl注入色谱仪测定以峰面积(Y)对进样量(μg)进行线性回归,回归方程为 Y=20 1.69×105X,r= 0.9999。说明进样量在0.3～4.9μg范围线性关系良 好,标准曲线为基本过原点的方程。 2. 供试品的含量测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，紫外吸收检测器，于230nm处测定丹参素(C9H10O5)的吸收值，计算出其含量。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
参考文献： |
余练康，曾春晓，钱广生等，高效液相色谱法测定乐脉颗粒及冠无颗粒中丹参素含量，中国中药杂志，1998，23(12)：927～928 |
