方法名称： |
明目地黄丸-丹皮酚测定-高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定明目地黄丸中丹皮酚的含量。 本方法适用于中成药明目地黄丸。 |
方法原理： |
供试品加硅藻土研细，加甲醇超声提取，定容，滤过，用高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长274nm处检测丹皮酚的吸收值，计算其含量。 |
试剂： |
1. 甲醇(色谱纯) 2. 丹皮酚对照品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱：十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂(LUNA C18 色谱柱，250mm×4.6mm) 1.3紫外吸收检测器 1.4超声发生器 2 色谱条件 2.1流动相：甲醇，流速1.0min/ml 2.2检测波长：274nm 2.3柱温：室温 |
试样制备： |
1. 对照溶液的制备 精密称取丹皮酚对照品12.5mg，置50ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀；精密吸取2ml置25ml容量瓶，加甲醇到刻度，摇匀即得浓度为20μg/mL的丹皮酚对照品溶液 2. 供试品溶液的制备 取明目地黄丸适量(大蜜丸、小蜜丸1.5g，水蜜丸1g、浓缩丸1g)，精密称定，加1.0g硅藻土研细，置100mL量瓶中，加甲醇超声提取30min后，冷却，加甲醇定容，摇匀，滤过，作为供试品溶液。 |
操作步骤： |
1. 标准曲线的建立 精密吸取丹皮酚对照品溶液(20μg/ml)1、4、8、12、20μL，注入液相色谱仪测定，以峰面积Y从纵坐标，进样量X为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程Y=8356160X 483850，r=0.9999；线性范围为0.02～0.4μg。 2.供试品含量测定 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液20μL注入高效液相色谱仪，紫外吸收检测器，于274nm处测定丹皮酚的吸收值，计算出其含量。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
参考文献： |
王胜利，唐春华，HPLC法测定明目地黄丸中丹皮酚，实用中西药结合临床，2002，2(2)：51 |
