方法名称： |
六味地黄丸-没食子酸/泽泻醇A乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇B/熊果酸-高效液相色谱/电喷雾电离-质谱分析 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法/电喷雾电离-质谱分析对六味地黄丸中没食子酸/泽泻醇Ａ乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇Ｂ/熊果酸进行了定性分析。 本方法适用于中成药六味地黄丸。 |
方法原理： |
供试品粉碎，加入95%乙醇超声波提取过滤。用高效液相色谱仪/电喷雾电离-质谱分析，通过二级质谱识别六味地黄丸中的九种化学成分，没食子酸/泽泻醇Ａ乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇Ｂ/熊果酸。。 |
试剂： |
1. 乙腈（HPLC级) 2. 95%乙醇（分析纯) 3. 超纯水 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 离子阱质谱联用仪及工作站 1.3 二极管阵列检测器 1.4 色谱柱：Zorbax SB-C18柱（250mm×5.6mm，5μm) 1.5超声发生器 2 色谱条件 2.1流动相：其中溶剂A为乙腈，溶剂B为水，梯度洗脱， 程序为5%A(保持5 min) ®10 min 30%Ａ®15 min50%Ａ®10 min90%(保持20 min)，流速1.0ml/min。 2.2二极管阵列检测器设定检测波长：254nm 2.3进样量：自动进样10μL 2.4 质谱条件的：ESI离子源，负离子检出模式；雾化气N2，压力68.948kPa(10psi)；干燥气N2，流速10L/min；扫描范围100－1200u。 |
试样制备： |
供试品溶液的制备 取六味地黄丸粉碎，称取粉末3 g，加入95%乙醇约50mL，超声波振荡提取3次，每次15 min，合并提取液，过滤。将滤液减压浓缩，用95%乙醇定容至50 mL，定容后用0 45μm微孔滤膜过滤，滤液作为HPLC-MS分析样品。 |
操作步骤： |
取供试品溶液，自动进样10μL，梯度洗脱，运行时间60分钟，进行高效液相色谱/电喷雾电离-质谱检测，二极管阵列检测器设定波长254nm，对样品进行全扫描，并对质量范围100－1200u的离子进行强度相加，从而获得样品总离子流色谱图，采用负离子检出模式对六味地黄丸中没食子酸/泽泻醇Ａ乙酸酯/番木鳖苷/莫罗苷/羟基芍药苷/梓醇/苯甲酰羟基芍药苷/泽泻醇Ｂ/熊果酸进行了定性分析。 |
参考文献： |
赵新峰，孙毓庆，六味地黄丸的高效液相色谱/电喷雾电离－质谱分析，色谱，2003，21（.5)：500～502。 |
