八珍丸—芍药苷的测定—高效液相色谱法 2

本方法采用高效液相色谱法测定八珍丸中芍药苷的含量。

本方法适用于八珍丸的大蜜丸或水蜜丸。

供试品于锥形瓶中，加50%乙醇浸渍，浓缩，浓缩液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长230nm处检测芍药苷的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇（色谱纯)

2. 乙醇 50%(v/v)

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

Hypersil C₁₈色谱柱（150mm×4.6mm, 5μm)

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 水=35 65

2.2 检测波长：230nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取大蜜丸约9g，水蜜丸约6g，精密称定。

2. 对照品溶液的制备

精密称取芍药苷对照品8mg，置10mL量瓶中，加50%乙醇至刻度，混匀，制成每1mL含芍药苷800μg的溶液,作为对照品储备液。

3. 标准溶液的制备

精密量取对照品储备液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0mL，置于10mL量瓶中，加50%乙醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4. 供试品溶液的制备

将供试品加5 g 硅藻土混合, 研细, 置50 mL 具塞锥形瓶中,加50%乙醇40mL，于40℃水浴浸渍4h，时时振摇, 滤过, 滤渣用50 %乙醇洗涤6次, 每次10 mL , 洗涤液与滤液合并, 浓缩,残渣加50 %乙醇溶解, 转移至10 mL 量瓶中, 用50 %乙醇稀释至刻度, 摇匀, 即得。

1标准曲线的绘制

精密吸取上述标准溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定芍药苷的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长230nm处测定芍药苷的吸收值，外标法计算出其含量。