方法名称： |
甘草浸膏—甘草酸的测定—正交函数分光光度法 |
应用范围： |
本方法采用正交函数分光光度法测定甘草浸膏里甘草酸的含量。 本方法适用于生药与制剂的分析 |
方法原理： |
用氧化铝柱吸附处理样品，用正交函数分光光度法测定甘草浸膏中甘草酸的含量。 |
试剂： |
1. 乙酸乙酯（化学纯) 2. 甲醇（色谱纯)] 3.甲酸(化学纯) 4. 氧化铝 |
仪器设备： |
WZF-800D2型分光光度计。 |
试样制备： |
1. 样液品制备 甘草浸膏 精密称取本品粉末6g，加水50ml溶解，加乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤，弃去初滤液，精密量取续滤液10ml，加氨试液6滴，置水浴上蒸至稠膏状，加水10ml溶解，缓缓加入盐酸（5-10)2ml，置冰水中放置30min，移至离心管中，离心，弃去上清液，再用水5ml洗涤容器及沉淀，离心，去上清液，如此洗至上清液近无色，用乙醇加热溶解沉淀，过滤至50ml量瓶中，再用热乙醇洗净离心管及滤器，至洗液无色，冷却至室温，用乙醇稀释至刻度，混匀，精密吸取该液1ml，上氧化铝，同时作为空白柱。以甘草酸单铵盐为展开剂展开，置254nm紫外灯下检视，均未检出甘草酸色斑，说明用水10ml洗脱，甘草酸无损失，10ml氨试液可将甘草酸完全洗脱。 2. 甘草酸阴性对照液的制备 精密量取样品溶液5mL，置于水浴上蒸干，加水0.5ml溶解，点于硅胶GF254 。 3.供试品溶液的制备 将供试品100mg置10mL容量瓶中，精确加氯仿-乙酸乙酯-甲醇（1：1：1)3mL，冷浸过夜，超声40分钟，离心，取出上清，氮气吹干，甲醇溶解，作为供试品溶液。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 精密吸取标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在选定的6个测试点测定吸收度，计算P2值，以P2为纵座标，浓度为横座标，作标准曲线，得回归方程为P2=6.6502 0.0294 r=0.09998 2. 样品的测定 精密吸取上述供试品溶液5ml，置10ml量瓶中，加水稀释至刻度，空白作同样稀释，以空白作为参比，在6个测试点测吸收度，计算出P2，通过回归方程计算出甘草酸含量。 |
参考文献： |
魏有良，党创世，正交函数分光光度法测定甘草浸膏和甘草流浸膏中甘草酸的含量，基层中药杂志，1998，12（2)：29-30 |
