方法名称： |
八珍益母丸—芍药苷的测定—高效毛细管电泳法 |
应用范围： |
本方法采用高效毛细管电泳测定八珍益母丸中芍药苷的含量。 本方法适用于八珍益母丸（水蜜丸)。 |
方法原理： |
供试品于锥形瓶中，加50%乙醇浸渍，浓缩，浓缩液进入高效毛细管电泳仪进行分离，用紫外吸收检测器，于波长230nm处检测芍药苷的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
1. 甲醇（色谱纯) 2.硼砂（分析纯) 3.芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所) 4.八珍益母丸(水蜜丸) (市售品) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效毛细管电泳仪，微孔滤膜(0.45μm) 及过滤装置，超纯水器 1.2 色谱柱 融熔石英毛细管柱(未涂渍) 50μm ×50cm。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相：50mmol/L 硼砂缓冲液,用氢氧化钠调pH为10.6。 2.2 检测波长：230nm 2.3柱温： 20℃ |
试样制备： |
1 称取供试品 水蜜丸约6g，精密称定。 2 对照品溶液的制备 精密称取在五氧化二磷减压干燥器中干燥36h 的芍药苷10.0mg ,用甲醇定容成浓度为1.0mg/ml 的对照品储备液。取储备液500μl ,置于1ml 容量瓶中,加运行缓冲液至刻度,进样,测定。 3供试品溶液的制备 将供试品加5 g 硅藻土混合, 研细, 置50 mL 具塞锥形瓶中,加50%乙醇40mL，于40℃水浴浸渍4h，时时振摇, 滤过, 滤渣用50 %乙醇洗涤6次, 每次10 mL , 洗涤液与滤液合并, 浓缩,残渣加50 %乙醇溶解, 转移至10 mL 量瓶中, 用50 %乙醇稀释至刻度, 摇匀, 即得。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 分别取芍药苷储备液62.5 、125、250 、500 、1 000μl ,用超纯水定容至1ml ,依次进样后,以药物浓度(C) 对峰面积与迁移时间之比值(X) 进行回归。 2.供试品的测定 运行缓冲液:50mmol/L 硼砂缓冲液,用氢氧化钠调pH为10.6 ; 操作电压: 20KV , 极性由正到负;采用压力进样,压力进样常数为10psi×S。运行缓冲液和样品溶液均经0.45μm 微孔滤膜过滤后使用。 毛细管冲洗方法: 每次开机用超纯水冲洗3min , 后用0.1mol/L 氢氧化钠冲洗3min ,再用超纯水冲洗3min ,然后运行缓冲液冲洗3min 。每次测定之间用运行缓冲液冲洗1min 。 供试品溶液压力进样各1nL到高效毛细管电泳仪，用紫外吸收检测器，于波长230nm处测定芍药苷的吸收值，外标法计算出其含量。 |
参考文献： |
陈勇川，朱卫民，刘松青.高效毛细管电泳法测定八珍丸和八珍益母丸中芍药苷的含量.中国药房，2003，13（7)：425-427 |
