牛黄上清片 大黄素的含量测定 高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定牛黄上清片中大黄素的含量。

本方法适用于牛黄上清片中大黄素的测定。

用反相高效液相色谱法分析大黄素，在254nm处检测大黄素的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇（色谱纯)

2. 三氟醋酸(分析纯)

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

色谱柱:ODS C₁₈ (250 mm ×4. 6 mm ,5μm)。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 0.1 %三氟乙酸 = 82 18，流速:1.0 mL/min

2.2 检测波长：254nm

2.3柱温：室温

1.供试品溶液的制备

取本品10 片,去包衣,精密称定,研细,精密称取约2 片的重量,置圆底烧瓶中,甲醇40ml ,水浴;回流1.5 h ,过滤,滤液置100 ml 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,取上清液5 ml ,离心5 min ,滤过,滤液作为供试品溶液。

2.对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品适量,置10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成含大黄素40mg/L的溶液，摇均，即得。

1.标准曲线的绘制

精密称取大黄素对照品适量,置50 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成大黄素标准储备液，再分别配制成5 种不同浓度的大黄素对照品溶液。依次进样，每次5μL，测定峰面积，以对照品溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归,得回归方程

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液5μL注入高效液相色谱仪，用紫外检测器测定大黄素的吸收度，计算出其含量。

方国民，任军. 牛黄上清片质量标准的研究. 安徽医药，2003，7（5)：329-330