方法名称: |
牛黄上清片—大黄酚的含量测定—高效液相色谱法 |
应用范围: |
本 方法采用高效液相色谱法测定牛黄上清片中大黄酚的含量。 本方法适用于牛黄上清片中大黄酚的测定。 |
方法原理: |
用反相高效液相色谱法分析大黄酚,在254nm处检测大黄酚的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇(色谱纯) 2. 三氟醋酸(分析纯) |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 色谱柱:ODS C18 (250 mm ×4. 6 mm ,5μm) 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相:甲醇 0.1 %三氟乙酸 = 82 18,流速:1.0 mL/min 2.2 检测波长:254nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1.供试品溶液的制备 取本品10 片,去包衣,精密称定,研细,精密称取约2 片的重量,置圆底烧瓶中,甲醇40ml ,水浴;回流1.5 h ,过滤,滤液置100 ml 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,取上清液5 ml ,离心5 min ,滤过,滤液作为供试品溶液。 2.对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品适量,置10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成含大黄酚10mg/L的溶液,摇均,即得。 |
操作步骤: |
1.标准曲线的绘制 精密称取大黄素对照品适量,置25 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成大黄酚标准储备液,再分别配制成5 种不同浓度的大黄素对照品溶液。依次进样,每次5μL,测定峰面积,以对照品溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得回归方程。 2. 供试品的测定 精密吸取上述供试品溶液5μL注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定大黄酚的吸收度,计算出其含量。 |
参考文献: |
方国民,任军. 牛黄上清片质量标准的研究. 安徽医药,2003,7(5):329-330 |