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牛黄上清片—大黄酚的含量测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 牛黄上清片—大黄酚的含量测定—高效液相色谱法
方法名称:
牛黄上清片—大黄酚的含量测定—高效液相色谱法
应用范围:

本 方法采用高效液相色谱法测定牛黄上清片中大黄酚的含量。

本方法适用于牛黄上清片中大黄酚的测定。

方法原理:

用反相高效液相色谱法分析大黄酚,在254nm处检测大黄酚的吸收值,计算出其含量。

试剂:

1. 甲醇(色谱纯)

2. 三氟醋酸(分析纯)

仪器设备:

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

色谱柱:ODS C18 (250 mm ×4. 6 mm ,5μm)

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相:甲醇 0.1 %三氟乙酸 = 82 18,流速:1.0 mL/min

2.2 检测波长:254nm

2.3柱温:室温

试样制备:

1.供试品溶液的制备

取本品10 片,去包衣,精密称定,研细,精密称取约2 片的重量,置圆底烧瓶中,甲醇40ml ,水浴;回流1.5 h ,过滤,滤液置100 ml 容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,取上清液5 ml ,离心5 min ,滤过,滤液作为供试品溶液。

2.对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品适量,置10 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成含大黄酚10mg/L的溶液,摇均,即得。

操作步骤:

1.标准曲线的绘制

精密称取大黄素对照品适量,置25 ml 量瓶中,加甲醇至刻度,制成大黄酚标准储备液,再分别配制成5 种不同浓度的大黄素对照品溶液。依次进样,每次5μL,测定峰面积,以对照品溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液5μL注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定大黄酚的吸收度,计算出其含量。

参考文献:

方国民,任军. 牛黄上清片质量标准的研究. 安徽医药,2003,7(5):329-330

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