方法名称: |
心通口服液—淫羊霍苷的测定—高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定心通口服液中淫羊霍苷的含量。 本方法适用于中成药心通口服液。 |
方法原理: |
供试品于分液漏斗中,用乙酸乙酯提取,经氨溶液和纯化水洗涤,置水浴上蒸干,残渣加甲醇溶解后,进样分析,用紫外吸收检测器,于波长270nm处检测淫羊霍苷的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇(色谱纯) 2. 乙酸乙酯(分析纯) 3. 氨溶液 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Hypersil ODS柱(4. 0 mm×250 mm ,5μm)。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相:甲醇 水= 30 70 2.2 检测波长:270nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 对照品溶液的制备 精密称取淫羊藿苷对照品2.4 mg ,甲醇溶解并定容至25mL , 作为对照品储备液。 2. 标准溶液的制备 精密量取对照品贮备液1.0 , 2.0 , 3.0 , 4.0 , 5.0 mL , 置10 mL 容量瓶中, 加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。 3. 供试品溶液的制备 精密量取样品溶液2mL ,置分液漏斗中,用乙酸乙酯提取5 次,每次5mL 合并乙酸乙酯液,氨溶液20mL洗5次,纯化水15mL洗3次,置水浴上蒸干,残渣加甲醇400μL溶解。 注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤: |
1.标准曲线的绘制 精密吸取上述标准溶液10μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器检测淫羊霍苷的吸收值,以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。 2. 供试品的测定 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器测定淫羊霍苷的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
叶强,王燕, 心通口服液中淫羊藿苷的含量测定. 2004,医药导报,23(9): 678. |