方法名称： |
心通口服液—葛根素的测定—高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定心通口服液中葛根素的含量。 本方法适用于中成药心通口服液。 |
方法原理： |
供试品经氯仿洗涤,正丁醇萃取,置水浴上蒸干,残渣加甲醇溶解后,进样分析，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测葛根素的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
1. 甲醇（分析纯) 2. 正丁醇（分析纯) 3. 氯仿(分析纯) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 YWG10mmC18柱（4.6mm´250mm)。 1.3 紫外吸收检测器 2. 色谱条件 2.1 流动相：甲醇 水=75 25. 2.2 检测波长：250nm 2.3柱温：室温. |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 精密称取葛根素50mg，加甲醇溶解，定容于25mL容量瓶中，作为贮备液。精密吸取贮备液1mL，以甲醇定容至100mL，作为对照品溶液。 2. 标准溶液的制备 精密量取对照品储备液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。 3.供试品溶液的制备 精密量取样品10mL，加氯仿15mL洗涤3次,弃去氯仿层,用正丁醇(每次10mL) 萃取4次，合并正丁醇部分，至水浴上蒸干，残渣用甲醇定容至5mL。然后精密吸取1mL，以甲醇定容至100mL. 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 精密吸取上述标准溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器测定葛根素的吸收值，以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 2. 供试品的测定 精密吸取供试品溶液10μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器测定葛根素的吸收值，计算出其含量。 |
参考文献： |
李冠忠，徐斌，高希章. HPLC法测定心通口服液中葛根素含量.山东医药工业,1996, 15(3):11，10. |
