方法名称: |
小儿热速清颗粒——黄芩苷的含量——高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定小儿热速清颗粒中黄芩苷的含量。 本方法适用于小儿热速清颗粒中黄芩苷的含量测定。 |
方法原理: |
用反相高效液相色谱法分析黄芩苷,在277nm处检测黄芩苷的吸收值,计算出其含量 |
试剂: |
1. 甲醇(色谱纯) 2.乙醇(色谱纯) 3.磷酸(分析纯) |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 色谱柱: Hypersil ODS (100 mm ×4. 6 mm ,5μm)。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相:甲醇 水 磷酸 = 47 53 0.2,流速:1.0 ml/min 2.2 检测波长:277nm 2.3柱温:30°C |
试样制备: |
1.供试品阴性对照溶液的制备 按处方量取除黄芩外其他各味药材,加入适量水煎煮60min ,煎液加入95 %乙醇直至不产生沉淀,过滤,取续滤液即得。 2.供试品溶液的制备 按处方量取加入适量水煎煮60min,煎液加入95 %乙醇直至不产生沉淀,过滤,取续滤液即得。 3.对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品7.3mg ,置于25ml 容量瓶中,加50 %甲醇至刻度,水浴加热溶解,冷却至室温,摇匀,即得黄芩苷对照液。 4. 标准溶液的制备 |
操作步骤: |
1.标准曲线的绘制 精密吸取上述标准溶液20μL注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定黄芩苷的响应值,以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。 2. 供试品的测定 精密吸取上述供试品溶液及阴性对照溶液分别进样20μ注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定黄芩苷的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
周萍,曹臣,喻坚柏. 小儿热速清颗粒提取工艺的研究. 湖南中医杂志,2004,20(4):78-79 |