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益元散—甘草酸的测定—高效液相色谱法

医药数据库中心 药学论坛 益元散—甘草酸的测定—高效液相色谱法
方法名称:
益元散甘草酸的测定—高效液相色谱法
应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定益元散中甘草酸的含量。

本方法适用于中药制剂益元散。

方法原理:

供试品用57%甲醇冷浸法提取益元散中的甘草酸,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外检测器检测甘草酸的吸收值,计算出其含量。

试剂:

1.无水甲醇

2.冰醋酸

3.甘草酸铵盐对照品

仪器设备:

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

岛津PC8 柱( 4 mm ×250 mm ):

1.3 紫外检测器

2 色谱条件

2.1 流动相:甲醇 水 醋酸 = 57.0 42.6 0.4

2.3柱温:40 ℃

2.4紫外检测波长254 nm

2.5 流速:2.0mL/min

试样制备:

1. 称取供试品

精密称取本品适量,(相当于甘草药材)0.3g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取甘草酸铵盐对照品0. 2000 g, 以甲醇热溶, 置100 m l 容量瓶定容至刻度。

3. 标准溶液的制备

精确吸取甘草酸铵盐对照液0. 5m l、1m l、2m l、3m l、4m l、5m l 分别置于5m l 容量瓶中, 用流动相定容摇匀,作为绘制标准曲线的系列浓度标准溶液。

4.供试品溶液的制备

将供试品置具塞锥形瓶中,以60 m L 57 % 甲醇溶液冷浸提取8 h, 离心分离10 min (3000 rpm ) , 吸取上清液经G4 砂芯漏斗抽滤, 滤液置100 m l 容量瓶中, 加57 % 甲醇溶液稀释至刻度备用,摇匀,作为供试品溶液。

注:“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

1. 标准曲线的绘制

精密吸取上述标准溶液5μL注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定甘草酸的吸收度,以标准溶液浓度对峰面积绘制标准曲线,进行线性回归,得到回归方程。

2. 供试品的测定

精密吸取上述供试品溶液5μL注入高效液相色谱仪,用紫外检测器测定甘草酸的吸收度,计算出其含量。

参考文献:

杜学勤,刘焕蓉,邓并,HPLC测定冷浸法提取中成药中的甘草酸含量,山西大学学报(自然科学版),2002,25 (1):48-51。

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