方法名称: |
一清口服液—黄芩苷的测定—高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定一清口服液中黄芩苷的含量。 |
方法原理: |
取一清口服液1.0ml,置10ml 容量瓶中, 加甲醇定容,取溶液20μl进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长275nm处检测黄芩苷的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇(色谱纯) 2 .磷酸二氢钠、磷酸(分析纯) 3.一清口服液 4 .黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所) |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪,型色谱工作站 1.2 色谱柱 ODS-2 C18色谱柱(4.6mm×250mm, 5μm)。 1.3 紫外吸收检测器:UV525 2 色谱条件 2.1 流动相:甲醇 水 冰醋酸=60 40 1。流速1ml/min。 2.2 检测波长:275nm 2.3 柱温:室温 |
试样制备: |
1. 对照品溶液的制备 精密称取黄芩苷对照品(105℃干燥至恒重)10mg,以流动相溶解, 定容至25ml 量瓶中, 分别精密量取1,2,3,4,5,6ml 置10ml 量瓶中, 用流动相定容至刻度, 摇匀。各进样20μl, 以加入量(μg)为横坐标, 以峰面积为纵坐标绘制标准曲线。 2.供试品溶液的制备 |
操作步骤: |
1. 标准曲线的绘制 精密称取黄芩苷对照品(105℃干燥至恒重) 10 mg, 以流动相溶解, 定容至25 m l 量瓶中, 分别精密量取1,2, 3, 4, 5, 6m l 置10 m l 量瓶中, 用流动相定容至刻度, 摇匀。各进样20 μl, 以加入量(μg) 为横坐标, 以峰面积为纵坐标绘制标准曲线, 得标准曲线方程。 2. 供试品的测定 精密吸取供试品溶液20μl注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长275nm处测定黄芩苷的吸收值,计算出其含量。 |
参考文献: |
吴成立, 吴卫新, 鲁彦毫.高效液相色谱法测定一清口服液中黄芩苷的含量.时珍国医国药,2001,12(11):975-976 |