方法名称： |
左金丸-小檗碱的测定-高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定左金丸中小檗碱的含量。 本方法适用于中成药制剂左金丸。 |
方法原理： |
供试品于锥形瓶中，加100:1水-盐酸，超声溶解。提取液过滤后进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长350nm处检测小檗碱的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
1 .甲醇 2.乙腈 3.磷酸二氢钾 4.盐酸 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 色谱柱为CLC2ODS C18 柱(150 mm ×416 mm , 5 Lm ) (Sh im 2pack)，理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3 000。 1.3 紫外吸收检测器 2 色谱条件 2.1 流动相：0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液 乙腈=75 25 2.2 检测波长：350nm 2.3柱温：室温 |
试样制备： |
1.对照品溶液的制备 精密称取在100 ℃干燥5h 的盐酸小檗碱对照品约30mg, 置100ml量瓶中, 加水-盐酸(100∶1) 适量, 超声10min 使溶解,放冷, 加水-盐酸(100∶1) 至刻度, 摇匀。精密量取2ml , 置25ml 量瓶中, 用水-盐酸(100∶1) 稀释至刻度, 摇匀, 即得。 2.供试品溶液的制备 取左金丸适量研细(过3号筛) , 取1g, 精密称定, 置100ml 量瓶中, 加水-盐酸(100∶1) 适量, 超声20 min 使溶解, 放冷, 加水-盐酸(100∶1) 至刻度, 摇匀, 离心。精密量取上清液2ml, 置25ml 量瓶中, 用水-盐酸(100∶1) 稀释至刻度, 摇匀, 即得。 |
操作步骤： |
1. 标准曲线的绘制 精密吸取稀释前的对照品溶液( 013 mg/mL ) 0125, 015, 110, 210, 310, 410 mL , 置25 mL 量瓶中, 用水-盐酸(100∶1) 稀释至刻度, 摇匀, 按上述色谱条件测定盐酸小檗碱吸收峰面积。以浓度(C) 对峰面积(A ) 绘制标准曲线，进行线性回归，得到回归方程。 2. 供试品的测定 精密吸取上述供试品溶液各20μL注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长250nm处测定盐酸小檗碱的吸收值，计算出其含量。
|
参考文献： |
周晖，HPLC 法测定左金丸中小檗碱的含量，中草药，2003，V34(11)：1008～1009 |
