方法名称： |
龙牡壮骨颗粒—维生素D2的测定—高效液相色谱法本方法采用高效液相色谱法对龙牡壮骨颗粒中维生素D2含量进行测定。 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法对龙牡壮骨颗粒中维生素D2含量进行测定。 本方法适用于龙牡壮骨的中成药。 |
方法原理： |
用反相高效液相色谱法测定了龙牡壮骨颗粒中维生素D2 (VD2)。 |
试剂： |
1. 甲醇（分析纯) 2 .乙醇（分析纯) 3 .抗坏血酸（分析纯) 4 .石油醚（分析纯) 5 .乙醚（分析纯) |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 Resolve Silica C18柱(5μm,200mm×4.6mmi.d.) 2 色谱条件 2.1流动相：甲醇 水=98 2 2.3柱温：室温 2.4流速1.5mL/min 2.5检测波长265nm |
试样制备： |
1. 标准溶液的配制 称取VD2对照品,用无水乙醇配置成5个不同质量浓度(C,mg/L)的标准溶液。 2. 供试品溶液的制备 龙牡壮骨颗粒约18g,经研细后与固体KOH(7.5g)、维生素C(0.1g)混合,并置于250mL平底烧瓶中。用50mL无水乙醇和100mL水使其溶解后于70℃水浴下回流45min,然后用石油醚(每次50mL)萃取3次。合并含有VD2的萃取液并在40～50℃水浴下旋转蒸发至干。 |
操作步骤： |
1.标准曲线的绘制 分别取10μL VD2标准溶液进样，色谱工作站自动计算峰面积(A)，由此得到HPLC检测的标准工作曲线的线性回归方程。 2. 供试品的测定 用无水乙醇洗涤蒸发瓶并移出VD2,定容至100mL,然后进行HPLC测试。 |
参考文献： |
张俐娜等:高效液相色谱法测定“龙牡壮骨冲剂”中维生素D2.色谱.2000，18（1)：52-54. |
