方法名称: |
银杏叶提取物-萜类内酯的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定银杏叶提取物中萜类内酯的含量。 本方法适用于银杏叶经加工制成的提取物。 |
方法原理: |
本品加乙酸乙酯提取,合并提取液回收溶剂至干,残渣加甲醇溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用蒸发光散射检测器检测,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2. 正丙醇 3. 四氢呋喃 4. 2%盐酸溶液 5. 乙酸乙酯 6. 5%醋酸钠溶液 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按白果内酯峰计算应不低于2500。 1.3 蒸发光散射检测器 2色谱条件 2.1流动相:正丙醇 四氢呋喃 水=1 15 84 2.2柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称定本品0.15g,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品和银杏内酯C对照品适量,加甲醇制成每1mL各含2mg、1mg、1mg、1mg的混合溶液;或精密称取已标示白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C含量的银杏叶对照提取物0.15g,照供试品溶液的制备方法,同法制成对照提取物溶液。 3. 供试品溶液的制备 取本品约0.15g,精密称定,加水10mL,置水浴中温热使溶散,加2%盐酸溶液2滴,用乙酸乙酯振摇提取4次(15 mL,10 mL,10 mL,10 mL),合并提取液,用5%醋酸钠溶液20 mL洗涤,分取醋酸钠液,再用乙酸乙酯10 mL洗涤。合并乙酸乙酯提取液及洗液,用水洗涤2次,每次20 mL,分取水液,用乙酸乙酯10 mL洗涤,合并乙酸乙酯液,回收溶剂至干,残渣用甲醇溶解并转移至5 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液(或对照提取物溶液)5mL、10mL,供试品溶液各5~10mL,注入高效液相色谱仪,用蒸发光散射检测器测定白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p281。 |