方法名称: |
杜仲叶-绿原酸的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定杜仲叶中绿原酸的含量。 本方法适用于杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥叶。 |
方法原理: |
本品加50%甲醇加热回流,放冷,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长327nm处检测绿原酸的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 50%甲醇 2. 乙腈 3. 0.4%磷酸溶液 |
仪器设备: |
1 仪器 .1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于2000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:乙腈 0.4%磷酸溶液=13 87 2.2检测波长:327nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称定本品粉末(过三号筛)1g,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取绿原酸对照品适量,置棕色量瓶中,加50%甲醇制成每1mL含50mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 取本品本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25mL,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长327nm处测定绿原酸(C16H18O9)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p114。 |