方法名称: |
独一味-木樨草素的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定独一味中木樨草素的含量。 本方法适用于唇形科植物独一味Lamio-phlomis rotate (Benth.) Kudo的干燥全草。 |
方法原理: |
本品加2.5mol/L盐酸甲醇溶液加热回流,放冷,称重,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长350nm处检测木樨草素的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2.0.4%磷酸溶液 3. 2.5mol/L盐酸甲醇溶液 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按木樨草素峰计算应不低于1500。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 0.4%磷酸溶液=55 45 2.2检测波长:350nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称定本品粉末(过三号筛)1g,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取木樨草素对照品适量,加甲醇制成每1mL含20mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入2.5mol/L盐酸甲醇溶液25mL,密塞,称定重量,加热回流30分钟,放冷,再称定重量,用2.5mol/L盐酸甲醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液2mL,置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长350nm处测定木樨草素(C15H10O6)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p184。 |