穿山龙－薯蓣皂苷元的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定穿山龙中薯蓣皂苷元的含量。

本方法适用于薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Maki-no的干燥根茎。

本品加甲醇超声处理，残渣加3mol/L盐酸溶液溶解并加热水解，放冷，用三氯甲烷加热回流两次，合并滤液，残渣加甲醇定容，摇匀，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长203nm处检测薯蓣皂苷元的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 3mol/L盐酸溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按薯蓣皂苷元峰计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水＝84 16

2.2检测波长：203nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称定本品粉末（过四号筛)0.5g，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取薯蓣皂苷元对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛)约1g，精密称定，置锥形瓶中，加入甲醇50mL，超声处理（功率250W，频率33kHz)30分钟，滤过，滤渣用甲醇20mL洗涤，合并甲醇液，回收甲醇蒸干，残渣加3mol/L盐酸溶液20mL（10mL，5mL，5mL)溶解，依次转移至锥形瓶中，水浴中加热水解30分钟。取出，放冷，加入三氯甲烷30mL，加热回流15分钟，用三氯甲烷30mL，同法处理一次，滤过，再用三氯甲烷30mL洗涤容器及残渣，合并三氯甲烷液，回收三氯甲烷至干，残渣加甲醇溶解并转移至25mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长203nm处测定薯蓣皂苷元（C₂₇H₄₂O₃)的峰面积，计算出其含量。