方法名称: |
苦地丁-紫堇灵的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定苦地丁中紫堇灵的含量。 本方法适用于罂粟科植物紫堇Corydalis bungeana Turcz.的干燥全草。 |
方法原理: |
本品加甲醇超声处理,放冷,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长289nm处检测紫堇灵的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 甲醇 2. 0.015mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7):取磷酸二氢钾1.58g和磷酸氢二钾0.76g,加水1000mL溶解,混匀,用氢氧化钠试液调节pH值至6.7。 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按紫堇灵峰计算应不低于6000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 0.015mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.7)=70 30 2.2检测波长:289nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称定本品粉末(过三号筛)0.5g,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取紫堇灵对照品适量,加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。 3. 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约0.5g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,密塞,称定重量,浸泡1小时,超声处理(功率250W,频率33kHz)30分钟,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长289nm处测定紫堇灵(C21H21O5N)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p139。 |