贯叶金丝桃－金丝桃苷的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定贯叶金丝桃中金丝桃苷的含量。

本方法适用于藤黄科植物贯叶金丝桃Hypericum perforatum L.的干燥地上部分。

本品加60%乙醇加热回流，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长360nm处检测金丝桃苷的吸收值，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 0.1%磷酸溶液

3. 60%乙醇

4. 甲醇

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按金丝桃苷峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 0.1%磷酸溶液＝16 84

2.2检测波长：360nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称定本品粉末（过三号筛)0.4g，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取金丝桃苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含32mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品粉末（过三号筛)约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入60%乙醇50mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用60%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长360nm处测定金丝桃苷（C₂₁H₂₀O₁₂)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p159。