蜂胶－白杨素、高良姜素的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定蜂胶中白杨素、高良姜素的含量。

本方法适用于蜜蜂科昆虫意大利蜂Apis mellifera L.的干燥分泌物。

本品粉末加丙酮置索氏提取器中加热回流，提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解定容，摇匀，滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长268nm处检测白杨素、高良姜素的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 0.15%磷酸溶液

3. 丙酮

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按白杨素峰计算应不低于6000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.15%磷酸溶液＝64 36

2.2检测波长：268nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称定本品粉末（过四号筛)0.1g，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取白杨素对照品15mg，高良姜素对照品10mg，分别置50 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取1 mL，各置10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

3. 供试品溶液的制备

取本品粉末（过四号筛)约0.1g，精密称定，置索氏提取器中，加丙酮100mL，加热回流至提取液无色，提取液回收溶剂至干，残渣用甲醇溶解并转移至100mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长268nm处测定白杨素（C₁₅H₁₀O₄)、高良姜素（C₁₅H₁₀O₅)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p249。