山楂叶—金丝桃苷的测定—高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定山楂叶中金丝桃苷的含量。

本方法适用于蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥叶。

本品细粉置于索氏提取器中，依次加入三氯甲烷和甲醇提取，蒸干，加稀乙醇溶解，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长363nm处检测金丝桃苷的吸收值，计算出其含量。

1. 三氯甲烷

2 .甲醇

3 .乙腈

4 .四氢呋喃

5 .0.5%冰醋酸溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按金丝桃苷峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 甲醇 四氢呋喃 0.5%冰醋酸溶液＝1 1 19.4 78.6

2.2检测波长：363nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密称定本品细粉1g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取金丝桃苷对照品适量，加稀乙醇制成每1mL含20mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品细粉1g，精密称定，置索氏提取器中，加三氯甲烷加热回流提取至提取液无色，弃去三氯甲烷液，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇继续提取至无色（约4小时)，提取液蒸干，残渣加稀乙醇溶解，转移至50 mL量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长363nm处测定金丝桃苷（C₂₁H₂₀O₁₂)的峰面积，计算出其含量。