方法名称: |
天山雪莲-无水芦丁、绿原酸的测定 -高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法采用高效液相色谱法测定天山雪莲中无水芦丁、绿原酸的含量。 本方法适用于菊科植物天山雪莲Saussurea involucrate (Kar.et Kir.) Sch. Bip.的干燥地上部分。 |
方法原理: |
本品粉末加入50%甲醇超声提取,放冷,补重,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长340nm处检测无水芦丁、绿原酸的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1. 50%甲醇 2. 0.4%磷酸 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按芦丁峰计算应不低于8000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:甲醇 0.4%磷酸 =38 62 2.2检测波长:340nm 2.3柱温:40℃ |
试样制备: |
1. 称取供试品 精密称定本品粉末(过三号筛)1g,为供试品。 2. 对照品溶液的制备 精密称取芦丁(120℃干燥至恒重)、绿原酸对照品适量,加50%甲醇制成每1mL含芦丁80mg、绿原酸60mg的混合溶液。 3. 供试品溶液的制备 取本品粉末(过三号筛)约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇50mL,称定重量,超声处理10分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长340nm处测定无水芦丁(C27H30O16)、绿原酸(C16H18O9)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p36。 |