蚕蛾公补片－补骨脂素、异补骨脂素的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定蚕蛾公补片中补骨脂素、异补骨脂素的含量。

本方法适用于中成药蚕蛾公补片。

本品加85%乙醇超声处理，放冷，补重，摇匀，离心，取上清液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长245nm处检测补骨脂素、异补骨脂素的吸收值，计算出其含量。

1. 85%乙醇

2. 乙腈

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按补骨脂素计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 水＝25 75

2.2检测波长：245nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，取1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取在105℃干燥至恒重的补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品适量，加85%乙醇制成每1mL含补骨脂素和异补骨脂素各20mg的混合溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入85%乙醇25mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用85%乙醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长245nm处测定补骨脂素（C₁₁H₆O₃)、异补骨脂素（C₁₁H₆O₃)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p553。