功劳去火片－盐酸小檗碱的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定功劳去火片中盐酸小檗碱的含量。

本方法适用于中成药功劳去火片。

1. 盐酸-60%甲醇（1：100)的混合溶液

2 .乙腈

3 .冰醋酸

4 .三乙胺

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 水 冰醋酸 三乙胺＝34 64 1 1

2.2检测波长：265nm

2.3柱温：30℃

1. 称取供试品

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取盐酸小檗碱对照品适量，加盐酸-60%甲醇（1：100)的混合溶液制成每1mL含10mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-60%甲醇（1：100)的混合溶液50mL，密塞，称定重量，置70℃水浴中加热45分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长265nm处测定盐酸小檗碱（C₂₀H₁₈ClNO₄)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p410。