清开灵注射液－胆酸的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定清开灵注射液中胆酸的含量。

本方法适用于中成药清开灵注射液。

本品加乙酸乙酯振摇提取，蒸干乙酸乙酯液，取上清液加甲醇稀释，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长238nm处检测胆酸的吸收值，计算出其含量。

1. 乙腈

2. 甲醇

3. 磷酸

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按胆酸峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈 水＝10 90

2.2检测波长：238nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

精密量取本品20mL，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取胆酸对照品适量，加甲醇制成每1mL含30mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

精密量取本品20mL，置具塞锥形瓶中，精密加入磷酸溶液（1→3)1mL，置2~10℃放置1小时，取出，放至室温，离心（每分钟3000转)20分钟，精密量取上清液5mL，置50mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长238nm处测定胆酸（C₁₇H₂₄O₁₀)的峰面积，计算出其含量。