三七片－人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定三七片中人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁的含量。

本方法适用于中成药三七片。

本品加甲醇加热回流，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长203nm处检测人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 乙腈

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按三七皂苷R₁峰计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：乙腈为流动相A，水为流动相B

2.2检测波长：203nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取本品10片，精密称定，研细，取约0.8g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取人参皂苷Rg₁对照品、人参皂苷Rb₁对照品和三七皂苷R₁对照品适量，加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg₁0.4mg、人参皂苷Rb₁0.4mg、三七皂苷R₁0.1mg的混合溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品10片，精密称定，研细，取约0.8g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上加热回流2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长203nm处测定人参皂苷Rb₃（C₅₃H₉₀O₂₂)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p323。