清音丸－ 葛根素的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定清音丸中葛根素的含量。

本方法适用于中成药清音丸。

本品经甲醇超声提取后，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长250nm处检测葛根素的吸收值，计算出其含量。

1. 0.5%醋酸溶液

2. 甲醇

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按葛根素峰计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.5%醋酸溶液＝20 80

2.2检测波长：250nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取本品水蜜丸，研碎，取约0.6g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取葛根素对照品适量，加甲醇制成每1mL含30mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取本品水蜜丸，研碎，取约0.6g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5~10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长250nm处测定葛根素（C₂₁H₂₀O₉)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p618。