血脂灵片－ 大黄素的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定血脂灵片中大黄素的含量。

本方法适用于中成药血脂灵片。

本品经加热回流，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长254nm处检测大黄素的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇

2 .2.5mol/L硫酸溶液

3 .三氯甲烷

4 .0.1%磷酸溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按大黄素峰计算应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 0.1%磷酸溶液＝85 15

2.2检测波长：254nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取装量差异项下的本品，研细，取约0.3g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品适量，加甲醇制成每1mL含大黄素10mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研细，取约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置具塞烧瓶中，蒸干，加2.5mol/L硫酸溶液10mL和三氯甲烷20mL，加热回流2小时，分取三氯甲烷液，水层用三氯甲烷10mL振摇提取，合并三氯甲烷液，用水10mL洗涤，取三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解，转移至10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长254nm处测定大黄素（C₁₅H₁₀O₅)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p442。