心宁片－丹参素的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定心宁片中丹参素的含量。

本方法适用于中成药心宁片。

本品加盐酸溶液超声处理，放冷，补重，摇匀，上清液用乙酸乙酯提取，提取液回收溶剂至干，残渣加50%甲醇溶解，稀释，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长283nm处检测丹参素的吸收值，计算出其含量。

1. 50%甲醇

2 .盐酸

3 .乙酸乙酯

4 .二甲基甲酰胺

5 .冰醋酸

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按丹参素峰计算应不低于6000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 二甲基甲酰胺 冰醋酸＝2 95 2 1

2.2检测波长：283nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约1g，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取丹参素钠对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含50mg的溶液。（相当于每1mL含丹参素45mg)

3. 供试品溶液的制备

取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约1g，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸溶液（1→50)50mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用上述盐酸溶液补足减失的重量，加氯化钠5g，摇匀，离心，精密量取上清液25 mL，置分液漏斗中，用乙酸乙酯振摇提取4次（50 mL，30 mL，20 mL，20 mL)，合并乙酸乙酯液，回收乙酸乙酯至干，残渣用50%甲醇溶解并转移至25 mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长283nm处测定丹参素（C₉H₁₀O₅)的峰面积，计算出其含量。