一清颗粒 – 黄芩苷的测定– 高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定一清颗粒中黄芩苷的含量。

本方法适用于中成药一清颗粒。

供试品加甲醇超声提取，用重蒸馏水稀释至一定体积，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长275nm处检测黄芩苷的吸收值，计算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸二氢钠缓冲液 0.2 mol/L, 用磷酸调节pH值至 2.7。

1 仪器

1.1高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按黄芩苷计应不低于5000。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 0.2mol/L磷酸二氢钠缓冲液（pH2.7)= 42 58

2.2 检测波长：275nm

2.3 柱温：室温

3 超声波发生器

1. 称取供试品

精密称取本品粉末约0.75g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取在105℃干燥至恒重的黄芩苷对照品12.5mg, 置250mL量瓶中，用少量甲醇溶解，用重蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

3. 供试品溶液的制备

供试品置100mL量瓶中，加甲醇10mL, 超声处理10分钟，用重蒸馏水稀释至刻度，取此液离心10分钟（每分钟转速为15000转)，分取上清液为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，紫外吸收检测器，于波长275nm处测定黄芩苷（C₂₁H₁₈O₁₁)的吸收值，计算出其含量。