更年安片 –大黄素的测定--高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定更年安片中大黄素的含量。

本方法适用于中成药更年安片。

供试品加甲醇，热回流提取，滤过，取续滤液减压回收至干。残渣加水，加盐酸及氯仿，加热回流，分取氯仿层，水层用氯仿提取多次后，合并氯仿提取液，减压回收至干。残渣加甲醇溶解，并稀释至一定体积，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外-可见分光光度计，于波长437nm处检测大黄素的吸收值，计算出其含量。

1. 乙腈

2.冰醋酸

3 .甲醇

4 .盐酸

5 .氯仿

1高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按大黄素峰计应不低于3000。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 水 冰醋酸 = 60 40 1

2.2 检测波长：437nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取本品20片，除去糖衣，精密称定，求得每片平均重量，研细，精密称取粉末约5g。

2. 对照品溶液的制备

精密称取大黄素对照品约10mg, 置100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25mL，置200mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀（每1mL中含大黄素12.5μg)。

3. 供试品溶液的制备

供试品置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，称定重量，加热回流30分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，减压回收至干，残渣加水20mL，加盐酸2mL，加氯仿20mL，加热回流30分钟，放冷，分取氯仿层，水层再用氯仿振摇提取3次，每次10mL，合并氯仿液，减压回收至干，残渣加甲醇使溶解，转移至25mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液。

注：“精密称定”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μL，注入高效液相色谱仪，紫外-可见分光光度计，于波长437nm处测定大黄素（C₁₅H₁₀O₅)的吸收值，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p.469。