注射用双黄连(冻干)－连翘苷的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定注射用双黄连（冻干)中连翘苷的含量。

本方法适用于中成药注射用双黄连（冻干)。

供试品用65%乙醇溶解，过中性氧化铝柱洗脱，洗脱液经稀释进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长278nm处检测连翘苷的峰面积，计算出其含量。

1.乙醇

2.冰醋酸

3. 乙腈

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按连翘苷峰计应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：乙腈 水 冰醋酸 = 25 75 0.1

2.2 检测波长：278nm

2.3 柱温：室温

1. 称取供试品

取装量差异项下的本品内容物，混匀，取0.1g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取连翘苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含20μg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

供试品用65％乙醇5mL分次溶解，加在中性氧化铝柱 （100~120目，5g，内径约1cm)上，用65％乙醇洗脱，收集洗脱液近25mL，置25mL量瓶中，加65％乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液10mL和供试品溶液20mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长278nm处测定连翘苷（C₂₉H₃₆O₁₅)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p505。