清开灵口服液—氮的测定—氮测定法

本方法采用氮测定法测定清开灵口服液中氮的含量。

本方法适用于中成药清开灵口服液。

蛋白质等含氮有机化合物与含硫酸钾、硫酸铜的硫酸溶液加热时，氮被还原为氨，以硫酸铵形式溶于硫酸中。反应完毕后，加氢氧化钠使溶液呈碱性，氨被游离，加热蒸馏时，氨与水蒸汽共同馏出，溶于硼酸接收液中，可用硫酸滴定液滴定氨的量，从而换算成氮的含量。

1.硫酸

2.40%氢氧化钠溶液

3. 30%硫酸铜溶液

4.2%硼酸溶液

5.甲基红指示液

6.甲基红—溴甲酚绿混合指示液

7.硫酸滴定液 (0.05mol/L)

1 设备

1.1 凯氏烧瓶 30~50mL

1.2 圆底烧瓶 1000 mL

1.3 氮气球

1.4 锥形瓶 100 mL

取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4 mL使溶解，再加水稀释至200 mL。

2. 甲基红—溴甲酚绿混合指示液

取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30mL，摇匀。

3. 硫酸滴定液 (0.05mol/L)

取硫酸3.0mL缓缓注入适量水中，冷却至室温，加水稀释至1000mL, 摇匀。

标定：精密称取在270-300⁰C干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.15g, 加水50mL使溶解，加甲基红—溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1mL硫酸滴定液 (0.05mol/L) 相当于5.30mg的无水碳酸钠。根据本液的消耗量与无水碳酸钠的取用量，算出本液的浓度。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。

蒸馏装置如图。图中A为1000mL圆底烧瓶，B为安全瓶，C为连有氮气球的蒸馏器，D为漏斗，E为直形冷凝管，F为100 mL锥形瓶，G、H为橡皮管夹。

连接蒸馏装置，A瓶中加水适量与甲基红指示液数滴，加稀硫酸使成酸性，加玻璃珠或沸石数粒，从D漏斗加水约50mL，关闭G夹，开放冷凝水，煮沸A瓶中的水，当蒸气从冷凝管尖端冷凝而出时，移去火源，关H夹，使C瓶中的水反抽到B瓶，开G夹，放出B瓶中的水，关B瓶及G夹，将冷凝管尖端插入约50mL水中，使水自冷凝管尖端反抽至C瓶，再抽至B瓶，如上法放去。如此将仪器洗涤2~3次。

精密量取本品3mL，置250mL凯式烧瓶中，加硫酸钾（或无水硫酸钠)—硫酸铜（10：1)0.5g、硫酸5mL，加热至溶液尽无色，放冷，转移至25mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取5mL，置干燥的30~50mL凯式烧瓶中，加硫酸钾（或无水硫酸钠)0.3g与30%硫酸铜溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0mL；在凯式烧瓶口放一小漏斗，并使凯式烧瓶成45°斜置，用小火缓缓加热使溶液保持在沸点以下，等泡沸停止，逐步加大火力，沸腾至溶液成澄明的绿色后，除另有规定外，继续加热10分钟，放冷，加水2mL。

取2%硼酸溶液10mL，置100mL锥形瓶中，加甲基红-溴甲酚绿混合指示液5滴，将冷凝管尖端插入液面下。然后，将凯式烧瓶中内容物经由D漏斗转入C蒸馏瓶中，用水少量淋洗凯式烧瓶及漏斗数次，再加入40%氢氧化钠溶液10mL，用少量水再洗漏斗数次，关G夹，加热A瓶进行蒸气蒸馏，至硼酸液开始由酒红色变为蓝绿色时起，继续蒸馏约10分钟后，将冷凝管尖端提出液面，使蒸气继续冲洗约1分钟，用水淋洗尖端后停止蒸馏。

馏出液用硫酸滴定液（0.005mol/L)滴定至溶液由蓝绿色变为灰紫色，并将滴定的结果用空白试验（空白和供试品所得馏出液的容积应基本相同，约70~75mL)校正。每1mL硫酸滴定液（0.005mol/L)相当于0.1401mg的N。

取用的供试品如在0.1g以上时，应适当增加硫酸的用量，使消解作用完全，并相应地增加40%氢氧化钠溶液的用量。