方法名称: |
止喘灵注射液-东莨菪碱的测定-高效液相色谱法 |
应用范围: |
本方法适用于中成药止喘灵注射液。 |
方法原理: |
本品经三氯甲烷振摇提取后,稀释后,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长216nm处检测东莨菪碱的吸收值,计算出其含量。 |
试剂: |
1.乙腈 2.磷酸钠溶液 3. 三氯甲烷 |
仪器设备: |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按氢溴酸东莨菪碱峰计算应不低于3000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相:乙腈 0.07mol/L磷酸钠溶液(含17.5mol/L十二烷基硫酸钠用磷酸调pH值至6.0)=30 60 2.2检测波长:216nm 2.3柱温:室温 |
试样制备: |
1.称取供试品 精密量取本品20mL,为供试品。 2.对照品溶液的制备 精密称取氢溴酸东莨菪碱对照品适量,用0.07mol/L磷酸钠溶液(用磷酸调pH值至6.0)溶解,制成每1mL含0.2mg的溶液。( 东莨菪碱重量=氢溴酸东莨菪碱/1.445) 3.供试品溶液的制备 精密量取本品20mL,置分液漏斗中,加2 mol/L盐酸溶液调节pH值至2,用三氯甲烷20mL振摇提取1次,弃去三氯甲烷液,酸水层用浓氨试液调pH值至9,用三氯甲烷振摇提取5次,每次20mL,合并三氯甲烷液,置温水浴上回收三氯甲烷至干,残渣用0.07mol/L磷酸钠溶液(用磷酸调pH值至6.0)溶解,转移至5 mL量瓶中,并稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。 |
操作步骤: |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20mL,注入高效液相色谱仪,用紫外吸收检测器于波长216nm处测定东莨菪碱(C17H21NO4)的峰面积,计算出其含量。 |
参考文献: |
中华人民共和国药典,国家药典委员会编,化学工业出版社,2005版,一部,p371。 |