方法名称： |
天麻首乌片－ 2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的测定－高效液相色谱法 |
应用范围： |
本方法采用高效液相色谱法测定天麻首乌片中2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。 本方法适用于中成药天麻首乌片。 |
方法原理： |
本品加甲醇加热回流，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长320nm处检测2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的吸收值，计算出其含量。 |
试剂： |
1.甲醇 2.乙腈 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1 高效液相色谱仪 1.2 色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰计算应不低于2000。 1.3 紫外吸收检测器 2色谱条件 2.1流动相：乙腈 水＝22 78 2.2检测波长：320nm 2.3柱温：室温 |
试样制备： |
1.称取供试品 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取适量（约相当于本品2片)，精密称定，为供试品。 2.对照品溶液的制备 精密称取2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含40mg的溶液。 3.供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取适量（约相当于本品2片)，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇25mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 |
操作步骤： |
分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5~10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长320nm处测定2，3，5，4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9)的峰面积，计算出其含量。 |
参考文献： |
中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p362。 |
