六味地黄丸－马钱苷的测定－高效液相色谱法

本方法采用高效液相色谱法测定六味地黄丸中马钱苷的含量。

本方法适用于中成药六味地黄丸。

本品经50%甲醇超声处理后，加热回流，上柱洗脱，残渣溶解加甲醇稀释，摇匀，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长236nm处检测马钱苷的吸收值，计算出其含量。

1.甲醇

2.乙腈

3.四氢呋喃

4.0.05%磷酸溶液

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按马钱苷计算应不低于4000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：四氢呋喃 乙腈 甲醇 0.05%磷酸溶液=1 8 4 87

2.2检测波长：236nm

2.3柱温：40℃

1.称取供试品

取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取约0.7g，精密称定；或取重量差异项下的大蜜丸，剪碎，取约1g，精密称定，为供试品。

2.对照品溶液的制备

精密称取马钱苷对照品适量，加50%甲醇制成每1mL含20mg溶液。

3.供试品溶液的制备

供试品，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率33kHz)15分钟使溶散，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10 mL，置中性氧化铝柱（100~200目，4g，内径1cm，干法装柱)上，用40%甲醇50 mL洗脱，收集流出液及洗脱液，蒸干，残渣加50%甲醇适量使溶解，并转移至10 mL量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1 0mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长236nm处测定马钱苷（C₁₇H₂₆O₁₀)的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p401。