脑得生丸－人参皂苷Rg1的测定－薄层扫描法

本方法采用薄层扫描法测定脑得生丸中人参皂苷Rg₁的含量。

本方法适用于脑得生丸中人参皂苷Rg1含量的测定。

供试品于索氏提取器中经乙醚加热回流，过滤，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解，制成供试液，点样、展开，以10%硫酸乙醇溶液显色，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λs=525nm， λ_R=700nm测量人参皂苷Rg₁（C₄₂H₇₂O₁₄)吸收度积分值，计算其含量。

1. 乙醚

2 .甲醇

3 .正丁醇

4 .氯仿

5 .醋酸乙酯

6 .硫酸 10％硫酸乙醇溶液

7 .乙醇

1 仪器

1.1索氏提取器

1.2薄层扫描仪

1.3点样器

一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。

1.4展开室

可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部平底或双槽，盖子须密闭。

2 材料

2.1高效硅胶G薄层板

2.2硅藻土

1. 对照品溶液的制备

精密称取人参皂苷Rg₁对照品适量，加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品，切碎，精密称取 约2g，加硅藻土 2g，研匀，置索氏提取器中，加乙醚适量，置水浴上回流2小时，弃去乙醚液，取出滤纸筒，晾干，待乙醚挥尽，将滤纸筒再置于索氏提取器中，加甲醇适量，放置过夜，加热回流提取至回流液无色，回收甲醇至干。残渣加水30mL使溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取5次（25mL、20mL、20mL、10mL、10mL)，合并提取液，用正丁醇饱和的水洗涤 3次，每次 25mL，弃去水层，提取液减压回收正丁醇，残渣加甲醇使溶解，转移至 5mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

1. 薄层板制备

用商品预制板－高效硅胶G薄层板。

2. 点样

精密吸取供试品溶液 2～4μL、对照品溶液 2μL与 4μL，分别交叉点于同一高效硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。

3. 展开

将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以氯仿－醋酸乙酯－甲醇－水（15：4O：22：10)5～10℃放置12小时的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于110℃加热至斑点显色清晰，取出。

4. 含量测定

在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，进行扫描，波长：λs=525nm， λ_R=700nm， 测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算。

用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。