止咳宝片—无水吗啡的测定—分光光度法

本方法采用分光光度法测定止咳宝片中无水吗啡（C₁₇H₁₉NO₃)的含量。

本方法适用于中成药止咳宝片。

供试品加适量氢氧化钙与少量水充分研磨，用水定容，滤过，取一定量续滤液加硫酸铵使其溶解，用苯振摇提取，再用水洗涤苯，洗液并入水层后，用不同比例的氯仿-乙醇提取数次，蒸干提取液，残渣加0.1mol/L溶解，定容。溶液加氨试液碱化，精密加亚硝酸钠乙醇试液，一定时间后定量加氨试液，于波长420nm处测定吸收度，按无水吗啡（C₁₇H₁₉NO₃)计算其含量。

1. 氯仿-乙醇（1:1)；（2:1)

2 .乙醇

3 .盐酸（0.1mol/L)

4 .氢氧化钙

5 .氨试液 取浓氨溶液400mL，加水使成1000mL

6 .亚硝酸钠乙醇试液 取亚硝酸钠5g，加60%乙醇使溶解成1000mL（临用前新鲜配制)

可见分光光度计

1. 对照品溶液的制备

精密称取105℃干燥1小时的无水吗啡对照品12mg，至200mL量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液适量使溶解并稀释至刻度，混匀，制成每1mL含无水吗啡60μg的溶液。

2. 供试品溶液的制备

取供试品30片，除去包衣。精密称定，求出平均片重，研细，精密称取适量(约相当于无水吗啡6mg)，加氢氧化钙1g，与水少量，研磨成糊状后，继续研磨15分钟，用水移至100mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，放置30分钟，用干燥滤纸过滤后，精密量取续滤液50mL，加硫酸铵0.5g并使其溶解，用苯振摇提取2次（25mL，15mL)，合并苯液，用水10mL洗涤，洗液并入水层后，用氯仿-乙醇（1:1)60mL振摇提取1次,再用氯仿-乙醇（2:1)提取3次（45mL、45mL、15mL), 合并提取液，用水10mL与乙醇5mL混合液洗涤，置水浴上蒸干，残渣加0.1mol/L盐酸溶液20mL使溶解（必要时加热)，滤入50mL量瓶中，容器用少量0.1mol/L盐酸溶液洗涤，洗液并入量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

供试品的测定

精密量取供试品溶液2份各5mL分别置于甲、乙两个具塞试管中，另精密量取对照品溶液2份各5mL分别置于丙、丁两个具塞试管中，于甲、丙试管中先精密加氨试液3mL，摇匀后，再精密加新制的亚硝酸钠乙醇试液2mL，乙、丁两管中先精密加新制的亚硝酸钠乙醇试液2mL，轻轻摇匀，15分钟后再精密加氨试液3mL，静置10分钟后，照分光光度法，分别以甲、丙溶液为空白，在420nm波长处测定乙、丁的吸收度。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p369。