方法名称： |
益母草流浸膏—盐酸水苏碱的测定—薄层扫描法 |
应用范围： |
本方法采用薄层扫描法测定益母草流浸膏中盐酸水苏碱的含量。 本方法适用于益母草流浸膏中盐酸水苏碱含量的测定。 |
方法原理： |
供试品经强酸性阳离子交换树脂柱分离，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解并定量稀释，即得供试品溶液，盐酸水苏碱对照品加甲醇溶解并定量稀释。点样、展开，以乙酸乙酯-正丁醇-盐酸（1：8：3)为展开剂，展开，取出，凉干，并在105℃加热15分钟，放冷，喷以稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇溶液（10：1)混合溶液至斑点显色清晰，用薄层扫描仪进行扫描，于波长λS=510nm，λR=700nm测得供试品吸光度的积分值与对照品吸光度的积分值，计算其含量。 |
试剂： |
1. 盐酸 2. 正丁醇 3. 乙酸乙酯 |
仪器设备： |
1 仪器 1.1薄层扫描仪 1.2涂布器 应能使吸附剂在玻璃板上手工或自动涂成一层符合厚度要求的均匀薄层。 1.3点样器 一般采用微升毛细管或与之相应的点样器材。 1.4展开室 可用适合薄层板大小的专用玻璃缸，底部双槽，盖子须密闭。 2 材料 2.1玻板 用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的规格，要求光滑、平整，洗净后不附水珠，晾干。 2.2吸附剂 硅胶G，其颗粒大小一般要求直径为10～40μm。 |
试样制备： |
1. 对照品溶液的制备 精密称取盐酸水苏碱对照品适量，加甲醇制成每1mL含2mg溶液，作为对照品溶液。 2. 供试品溶液的制备 取供试品，精密称取约5g，用稀盐酸调节pH值至1~2，置强酸性阳离子交换树脂柱上，以每分钟8mL的速度用水洗至流出液近无色，弃去水液，再以每分钟2mL的速度用2mol/L的氨水溶液150mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解转移至10mL量瓶中，并定量稀释之刻度，作为供试品溶液。 注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。 |
操作步骤： |
1. 薄层板制备 将吸附剂1份和水3份在研钵中向一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布（厚度为0.25～0.5mm)取下涂好薄层的玻板，于室温下，置水平台上晾干，在反射光及透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点、无气泡、无破损及污染，于110℃烘30分钟，冷却后立即使用或置干燥箱中备用，或用商品预制板。 2. 点样 精密吸取供试品溶液 8μL、对照品溶液 3μL与 8μL，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，如用点样器点样到薄层板上，一般为圆点，点样基线距底边1.0～1.5cm，样点直径一般不大于2mm，点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。 3. 展开 将点好样品的薄层板放入展开缸的展开剂中，以乙酸乙酯-正丁醇-盐酸（1：8：3)为展开剂，展开，取出，晾干。 4. 含量测定 在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，选择反射方式，采用吸收法，进行扫描，于波长λS=510nm，λR=700nm测得供试品吸光度的积分值与对照品吸光度的积分值，计算其含量 用外标法测定时，若对照品各数据点在校正曲线上呈一通过原点的直线时，可用一点法校正，如不通过原点通常宜采用二点法校正，必要时用多点法校正。 |
参考文献： |
中华人民共和国药典，国家药典委员会编、化学工业出版社，2005年版，一部p.280。 |
